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DNA定量試劑盒的檢測(cè)規(guī)程

更新時(shí)間：2017-07-04

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DNA定量試劑盒結(jié)果判斷，如果Ct值＝40，則實(shí)驗(yàn)樣品的UU DNA含量（基因拷貝數(shù)/ml）＜1×103。如果Ct值＜40，則實(shí)驗(yàn)樣品的UU DNA含量（基因拷貝數(shù)/ml）＝ M。檢測(cè)樣本中核酸陽性時(shí)，按實(shí)際結(jié)果報(bào)告；對(duì)可疑結(jié)果應(yīng)復(fù)查，需要時(shí)與臨床。注意事項(xiàng)，各標(biāo)本沸水浴時(shí)間誤差不超過1分鐘。加樣時(shí)每加完一個(gè)要立即蓋上封閉好離心管。

DNA定量試劑盒操作時(shí)，須戴手套。使用新鮮配制的染色工作液，務(wù)必不要超過 2 小時(shí)，且注意避光。建議使用塑料管配制染色工作液，而不是玻璃制品。孵育時(shí)，避免光照。系統(tǒng)檢測(cè)，標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定 1 次即可；如果儀器更換，則需要重新測(cè)定 1 次。如果熒光讀數(shù)過高，可以相應(yīng)稀釋樣品量?？梢允褂脽晒饷笜?biāo)儀檢測(cè)，試劑用量和體系均除以 5，包括標(biāo)準(zhǔn) DNA 含量，其計(jì)算公式[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)DNA 濃度（微克）X樣品稀釋倍數(shù)]÷0.1（樣品容量；毫升）＝微克/毫升。鹽類、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白、瓊脂糖、單鏈 DNA 和 RNA 不會(huì)干擾檢測(cè)。

DNA定量試劑盒關(guān)閉擴(kuò)增儀蓋，按儀器操作規(guī)程開始循環(huán)。擴(kuò)增結(jié)束后關(guān)閉擴(kuò)增儀電源，取出PCR反應(yīng)管，密封放入垃圾桶。產(chǎn)物分析，條件設(shè)置：反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存檢測(cè)數(shù)據(jù)文件，調(diào)整熒光數(shù)值為F1/F2。點(diǎn)擊Quantification讀取結(jié)果?；€的確定：取3～8個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)。