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預(yù)染蛋白Marker和未預(yù)染蛋白Marker有哪些不一樣

更新時(shí)間:2021-07-27點(diǎn)擊次數(shù):1775
 
  在Western實(shí)驗(yàn)中,蛋白Marker可以監(jiān)控蛋白質(zhì)在SDS-PAGE中的遷移,監(jiān)控蛋白的轉(zhuǎn)膜效率,確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是westernblot實(shí)驗(yàn)成功的條件之一。蛋白Marker分為兩種:一種是未預(yù)染的Marker,即寬分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn),高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)及低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn);另一種是預(yù)染的Marker,即單色預(yù)染和多色預(yù)染。
  一、未預(yù)染蛋白Marker
  未預(yù)染的蛋白Marker是簡(jiǎn)單,也是最準(zhǔn)確的一種,由于沒(méi)有附帶染料分子或者標(biāo)記大小正好是蛋白原本的大小,是精確判斷蛋白大小必須的?,F(xiàn)在的Marker多數(shù)選用預(yù)混合的marker,方便不同大小蛋白的比較。
  二、預(yù)染蛋白Marker
  預(yù)染蛋白Marker是一些純化較好的蛋白混合物,通過(guò)與染料共價(jià)偶聯(lián),在電泳過(guò)程中或者轉(zhuǎn)膜時(shí)可以直接觀察到。預(yù)染Marker的出現(xiàn)方便了我們的實(shí)驗(yàn),這種蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)可以幫助我們?cè)陔娪緯r(shí),電泳后,以及轉(zhuǎn)膜后檢測(cè)電泳情況和估計(jì)遷移率。值得注意的是預(yù)染蛋白Marker與染料共價(jià)偶聯(lián),所以在不同的緩沖條件下電泳時(shí)遷移特性可能會(huì)發(fā)生某些變化,可能導(dǎo)致一些偏差,所以不太適合精確定位蛋白。

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